Protocol and procedure for silver staining（蛋白银染）

GE Healthcare
Instructions 71-7177-00 AL
PlusOne Silver Staining Kit, Protein
General information
Wear gloves at all times. Perform all steps at 21 to 25°C with constant gentle agitation on a shaker.
The quality of the water used for making up the reagents and for washing the gel will affect the staining result. For best results use water with a conductivity of 5 MΩ or more (e.g. Milli-Q™ water).
Freshly made solutions (not older than 24 hours) give best results.
Precautions: The chemicals in this kit should not be discarded via public waste water systems. Please dispose of these chemicals properly. Consult your local regulations for more information.Read the warning text on the label of each bottle and packet.
ExcelGel SDS, ExcelGel XL SDS 12-14 and mini slab gels 0.5 mm
Chemicals required
• Chemicals included in this PlusOne Silver Staining Kit, Protein
• Ethanol
• Glacial acetic acid
• Glycerol (87% w/w) (1000 ml) (Code No. 17-1325-01)
Reagents
Make up the following reagent solutions using the chemicals listed above.
250 ml solution is needed per gel and step except for ExcelGel XL SDS 12-14, which requires 400 ml per gel and step and for Mini slab gels which require 125 ml solution per gel and step.
Note: Glutardialdehyde and formaldehyde should be added immediately before use.

Staining procedure

All steps should be performed with gentle shaking of the staining tray.

1 Fixation: 30 min.

Soak the gel in fixing solution for 30 minutes.

2 Sensitizing: 30 min.

Remove the solution. Add sensitizing solution and leave shaking for at least 30 minutes.

3 Washing: 3 x 5 min.

Remove the sensitizing solution. Add distilled water and wash three times for 5 minutes each time.

4 Silver reaction: 20 min.

Add silver solution and leave shaking for 20 minutes.

5 Washing: 2 x 1 min.

Remove the silver solution. Rinse twice in distilled water for one minute each time.

6 Developing: 2 to 5 min.

Add developing solution and leave shaking for 2 to 5 minutes. Transfer the gel to stopping solution when the bands / spots have reached desired intensity.

7 Stopping: 10 min.

Leave gel shaking in stopping solution for 10 minutes.

8 Washing: 3 x 5 min.

Remove the stop solution. Add distilled water and wash three times for 5 minutes each time.

9Preserving:

20 min. (plastic-backed gels)

2 x 30 min. (gels not supported on plastic films)

Add preserving solution and leave shaking for 20 minutes for plastic backed gels. For gels not supported on plastic films, shake for 30 minutes, pour off the solution, add fresh and shake for a further 30 minutes.

10 Drying: Overnight

Put the gel on a glass plate and wrap it in Cellophane sheet. Leave the gel to dry overnight at room temperature. Do not put the gel in a heating cabinet (the silver stain bleaches at elevated temperatures).

对旅行者的50句忠告

一、 不要接近峨眉山的和尚。
　　二、 不要接近崂山的道士。
　　三、 不要买九寨沟的牦牛肉。
　　四、 不要买三峡船上的玉器珠宝。
　　五、 不要在西双版纳参加“抢亲”游戏。
　　六、 不要在西安的古玩一条街购买古物。
　　七、 不要在大理购买所谓“老乡”的便宜珠宝。
　　八、 不要在阳朔的酒吧里消费。
　　九、 不要招惹泰山景区的当地人。
　　十、 不要参观少林寺时走“捷径”。
　 十一、 不要逛十三陵“***”玉石店。
　　十二、 不要单独去海南旅游
　　十三、 不要在坝上草原骑马。
　　十四、 不要在吐鲁番买葡萄。
　　十五、 不要在深圳中英街购买任何物品。
　　十六、 不要参加北京当地的长城一日游。
　　十七、 不要在张家界住便宜小旅馆。
　　十八、 不要在井冈山为“老区建设”捐款。
　　十九、 不要在杭州的娱乐场所消费。
　　二十、 不要在苏州的茶楼喝茶。
二十一、 不要在丰都鬼城照“免费”像。
　　二十二、 不要在北海乘坐摩托艇。
　　二十三、 不要在北戴河吃海鲜。
　　二十四、 不要在三亚海边接近小商贩。
　　二十五、 不要随导游在呼伦贝尔草原上吃烤全羊。
　　二十六、 不要在庐山乘个体出租车上山。
　　二十七、 不要在宏村的路上坐出租车。
　　二十八、 不要去黄山让人“免费带路”。
　　二十九、 不要在千岛湖码头的排档吃鱼。
　　三十、 不要参观乐山景区周边的付费景点。
三十一、 不要在郑州黄河游览区骑马。
　　三十二、 不要到恒山算命。
　　三十三、 不要随旅游团环游青海湖。
　　三十四、 不要买神农架的土特产。
　　三十五、 不要在敦煌的夜市吃地摊饭。
　　三十六、 不要在花果山的海鲜一条街吃饭。
　　三十七、 不要随导游逛清明上河园。
　　三十八、 不要在南京做“免费美容”。
　　三十九、 不要在上海外滩让人给你照数码像。
　　四十、 不要买“便宜票”看黄果树大瀑布。
四十一、 不要随导游在香港买名表和珠宝。
　　四十二、 不要投大钱在澳门赌博。
　　四十三、 不要在威海韩国城购买没经狠杀价的商品。
　　四十四、 不要在丽江洗桑拿浴。
　　四十五、 不要到五台山的五爷庙烧香。
　　四十六、 不要在平遥摸“鱼洗”。
　　四十七、 不要在武夷山景区买茶叶。
　　四十八、 不要在白洋淀景区买鸭蛋。
　　四十九、 不要在乌镇让道士“免费看相”。
　　五十、 不要去太阳岛坐“热心人”介绍的船

素菜第一品-竹笋